扩增子,高通量测序中Amplicon和reads的区别是什么
来源:整理 编辑:智能门户 2023-08-18 21:49:57
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1,高通量测序中Amplicon和reads的区别是什么
amplicon是扩增子,一般是指PCR扩增出来的片段而reads是测序仪通过测序引物测出来的序列
2,扩增子的介绍
扩增子(amplicon)为DNA或RNA扩增后的一段核苷酸序列。比如通过PCR扩增得到的某个基因的扩增片段。

3,用于扩增子测序的pcr扩增一般采用多少循环数
没有规定,只要目的条带清晰可见就行,可以根据预实验来确定。过多的循环数会导致碱基错配,过少循环导致产物太少不利于测序。这个看你模板的浓度以及目的了。如果是鉴定,25循环就够了。如果是要纯化后连接或者测序,可以适当增加
4,请问在生物学中扩增子的具体定义是什么
cnki对扩增子的定义:在扩增期间以拷贝数增加的DNA称为扩增子英文描述更好理解:The product of PCR or LCR; a piece of DNA that has been synthesized using amplification techniques.更简单的:A cloned, amplified (by PCR), DNA sequence或者:the DNA product of a PCR reaction, usually an amplified segment of a gene or DNA或者:artificially made nucleic acid fragment: a nucleic acid fragment that is the product of the artificial large-scale reproduction of genetic material说白了就是经过人工扩增的DNA片段搞不明白现在很多生物学上的名词,明明可以简单明了的表述,偏偏要故弄玄虚....
5,全基因组组测序结果 扩增子和reads的区别是什么
扩增子是指经过PCR扩增出来的产物。reads是指某个片段经过测序得到序列信息。这个是第二代测序技术上的名词,conting是指测序得到的短reads组装成的较长序列(序列完整,中间无断点);而scaffold是根据测序reads的pairend关系将conting序列进一步组装成的更长序列(这种序列中间可能有断点)
6,扩增子测序和高通量测序区别
微生物多样性测序(扩增子测序)是基于二代高通量测序对16S/18S/ITS等序列进行测序。可以同时检测样本中的优势物种、稀有物种及一些未知物种的检测,获得样本的微生物群落组成以及相对丰度。相信关注我们的小伙伴对此并不陌生。这次我们整合了大家平时会遇到的一些问题,在原有的基础上对报告进一步完善。报 告 全 新 升 级 想知道总体结果?先看这——项目概述重要指数 :★★★★★这部分内容必看。主要是汇总信息,包括样本数据量,测序质量,重复性效果评估,分组信息,组间差异评估,代谢途径上差异,功能预测等。这里会给出本项目中的一些重要提示,帮你从众多的报告信息中获取关键的部分。实验、分析流程怎么写?——技术介绍重要指数 :★★★技术介绍这部分内容,就是说我们基于是怎么样一个测序平台、什么方法来获得的最后的数据。如果你担心 这么直观的报告,会不会不够详细?小问号里有宝藏!如上图,点击实验流程旁边的小问号,弹出的文件夹里就有详细的英文版方法介绍。数据质量怎么样 ——OTU/ASVs结果统计 重要指数 :★★★★这部分内容主要是数据统计的图表:Raw-tags: 样本的原始序列数据Singleton: 无完全匹配的单条序列数量tagsmatchedASVs: 比对到最终ASVs的序列数据ASVs:以及ASVs的种类个数参数自由选择,图片灵活生成——物种注释及构成重要指数 :★★★★经过SILVA138数据库的注释,得到ASVs的物种注释结果。这一部分可以看到每个样本的物种构成比例,Taxonomic Level 可以选择Level1 ~ Level7 界门纲目科属种,不同分类水平下的物种构成。这里选择level2就是“界”层级(可根据需求自选),另外比如选一个groups分组,如下:柱状图太宽?太窄?一拉即可调整!同时给出了各分类水平的相关原始数据,可以到对应路径进行查看。表格任意排序,3D动图自由切换——多样性分布结果重要指数 :★★★★α多样性评估单个样本内的物种构成的丰度情况使用Qiime2进行α多样性分析,分别计算获得
7,扩增子测序如何选取丰度最高的前十个属
可以,你用的是随机引物?不管你用的是什么引物,只要你将片段扩增出来就可以测序。你先把扩增产物纯化,连接到T载体,然后转菌,因为这种测序方式利用的是载体上的通用引物,和产物序列无关,所以你的产物可以放心测序。结果靠谱但并没多大用,你知道了又怎样!大多数没有解决方案,过度医疗而已转录组测序哪个指标反映基因表达丰度通过转录组测序研究基因表达的理论基础是:通过随机抽样测序,某一转录本的抽 样频率在大样本下逼近该转录本在转录组中的相对丰度。
8,扩增子宏基因组宏转录组三大法宝玩转肠道微生物
俗话说,“遇事不决,量子力学;机制难寻,肠道菌群”。和研究物理学微观粒子的量子力学一样,我们肚子里面肠道菌群也是一个神奇的微观世界,里面包含约100万亿个微生物,有人体细胞总数的10倍之多,影响着宿主的饮食、疾病、以及生长发育等。面对数目如此庞大的肠道微生物,要使用哪些技术去了解其物种的组成,发挥的功能,以及对宿主的影响呢?下边,我们就为大家献上研究肠道微生物的 “三大法宝”。 首先,我们可以通过扩增子测序技术获悉肠道中存在哪些微生物,以及每种微生物的丰度占比。 扩增子测序即通过提取样品的DNA,选择合适的引物扩增16S rDNA区域,通过检测扩增区域的序列变异和丰度,以研究样本中物种分类、物种丰度以及系统进化。该技术可以克服传统分离培养的缺点,对样品中的微生物进行定性和定量,加之具有相对较低的成本,更加快速的周期等特点,深受微生物研究者的青睐。 补充知识点 Q: 为什么要扩增16S rDNA区域? A: 16S rDNA是细菌的系统分类研究中最有用的和最常用的分子钟,素有“细菌化石”之称。16S rDNA由于分子大小适中,既能体现不同菌属之间的差异,又能利用测序技术得到其序列,故广泛应用在微生物群落研究中。 了解肠道的微生物群落分布和比例后,要怎么知道这些微生物能做什么,或者可以行使哪些功能呢。借助宏基因组,上述问题都可以得到完美的解答。 宏基因组,是以特定生境中的整个微生物群落作为研究对象,提取环境样本DNA后,采用二代测序技术,通过组装获得环境中所有微生物基因信息总和。用于研究样品中全部微生物群落的多样性及群落功能差异。 借助扩增子和宏基因技术,我们可以知道肠道中存在的微生物的群落分布和具备的功能,若想进一步解析微生物此时此刻正在做什么,就离不开宏转录组了。 宏转录组可以研究在特定条件下,环境/组织样本中所有的微生物的RNA的集合,利用高通量测序,可以直接获得样本中所有微生物转录组信息,能够从转录水平研究复杂微生物群落变化,挖掘潜在的新基因。 三个技术比较如下: 如果说扩增子是初步探究样本种微生物群落分布,宏基因组则能更加全面揭示群落物种的功能,而宏转录组可以在RNA水平解析微生物基因表达谱。三个技术相互结合使用,可以更好的解释肠道中“存在哪些微生物,微生物能做什么,以及微生物正在做什么”的问题,帮助科学家更全面的了解肠道微生物的组成以及对宿主生命健康的影响。 高谷物(HG)饲料可以改变瘤胃微生物群,但在反刍动物盲肠中微生物对HG饲料的反应以及随后的微生物-宿主相互作用仍未得到探索。 研究使用16S扩增子测序研究了饮食变化如何改变绵羊盲肠微生物组,并使用宏基因组测序深入了解盲肠微生物对饮食转变挑战的适应性反应。发现喂食HG会对绵羊盲肠微生物组成和代谢的造成干扰,导致黏膜损伤,这些发现提供了在喂食HG过程中盲肠微生物结构和适应时间进程的综合概况,有助于进一步阐明反刍动物盲肠疾病的病因学。 肥胖和2型糖尿病的发病率在全球范围内呈现逐渐增长的趋势,但两者合并症人群的肠道微生物特征还不清楚文章研究了约1280人的肠道微生物组。发现肥胖与微生物的组成、个体分类和功能改变有关。T2D与肠道菌群的相关性并不明显;药物(如降压药和降糖药)以及膳食补充剂,与肠道菌群变化显著相关。总之,本研究将肥胖和D2T这两种相互关联的代谢疾病的微生物成分区分开来,确定了未来研究中需要考虑的饮食和给药因素。 微生物暴露对于新生儿和婴儿的生长发育和免疫起着至关重要的作用。然而,出生前的胎儿肠道中是否存在微生物仍然存在争议。研究将通过无菌子宫切除术出生的足月羔羊作为研究产前肠道微生物的动物模型进行多组学研究。首次证实反刍动物在出生前肠道中已定植活性微生物组,为胎儿肠道微生物定植始于子宫提供了依据。对于通过调控早期宿主-微生物互作来促进动物生长发育和机体健康具有重要的理论意义,对于幼龄动物的早期培育有重大的价值。 “三大法宝”不仅可以用来研究肠道微生物,还可应用在各类微生物研究中,如土壤、空气等环境样本,肿瘤、皮肤等动物样本,以及叶片、果实等植物样本,可以说,只要涉及群落微生物研究,就一定离不开这“三大法宝”。
9,探针捕获测序和扩增子测序的区别
探针捕获测序和扩增子测序的区别转录组即某个物种或特定细胞在某一功能状态下产生的所有RNA(包括mRNA,smallRNA及non-coding RNA等)的总和。转录组测序是指利用第二代高通量测序技术进行cDNA测序,全面快速地获取某一物种特定器官或组织在某一状态下的几乎所有转录本。相对于传统芯片而言,转录组测序无需预先设计探针,即可对任意物种的任意细胞类型的转录组进行检测,能够提供更精确的数字化信号,更高的检测通量以及更广泛的检测范围,是目前深入研究转录组复杂性的强大工具。基因表达谱指通过构建处于某一特定状态下的细胞或组织的非偏性cDNA文库,大规模cDNA测序,收集cDNA序列片段、定性、定量分析其mRNA群体组成,从而描绘该特定细胞或组织在特定状态下的基因表达种类和丰度信息,这样编制成的数据表就称为基因表达谱。
10,请问在生物学中扩增子的具体定义是什么
cnki对扩增子的定义:在扩增期间以拷贝数增加的DNA称为扩增子英文描述更好理解:The product of PCR or LCR; a piece of DNA that has been synthesized using amplification techniques.更简单的:A cloned, amplified (by PCR), DNA sequence或者:the DNA product of a PCR reaction, usually an amplified segment of a gene or DNA或者:artificially made nucleic acid fragment: a nucleic acid fragment that is the product of the artificial large-scale reproduction of genetic material说白了就是经过人工扩增的DNA片段搞不明白现在很多生物学上的名词,明明可以简单明了的表述,偏偏要故弄玄虚....
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扩增子 高通 高通量测序 测序 扩增子
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