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1，分子荧光光谱分析的介绍

利用某些物质分子受光照射时所发生的荧光的特性和强度，进行物质的定性分析或定量分析的方法。

分子荧光光谱分析的介绍

2，为何荧光分析法的灵敏度比紫外可见分光光度法的灵敏度高

紫外-可见分光度法比较， 荧光分析法具有更高的灵敏度。 荧光强度与激发光强度成 ... 维生素B2 在pH＝6～7 时荧光最强， ... 中经光线照射， 会发生分解而转化为光黄素， 后者的荧光比核黄素的荧光强的多。 ...
这是由于荧光分析法是在入射光直角方向测定荧光强度，即在黑背景下检测，因此可以通过增加入射光强度来提高灵敏度，而紫外 可见测定参数是A，该值与入射光强度和透射光比值有关，入射光增大，透射光也增大，增大检测器的放大倍数，也影响入射光和透射光的检测，因此限制了灵敏度

为何荧光分析法的灵敏度比紫外可见分光光度法的灵敏度高

3，简要叙述原子荧光光谱分析法原理及方法的主要特点

原子荧光光谱法（AFS）是用一定的激光光源（连续光源或者线光源）发射具有特征信号的光，照射含有一定浓度的待测元素的原子蒸气后，其中的自由原子被激发跃迁到较高能级，然后去激发跃迁到某一较低能级（长春市基态）或去激发跃迁到不同于原来能级的另一较低能级而发射出各种特征原子荧光光谱，由此可以辨别元素的存在，并根据测量的荧光强度求出待测样品中元素的含量。 该式为原子荧光分析的基本关系式。 上述说明，在一定的条件下，荧光强度I(f)与基态原子数N0成正比，也就是I(f)与待测原子浓度成正比。 K在一定条件下是常数，c为待测原子浓度。 原子荧光光谱法的主要特点为： 灵敏度较高荧光谱线比较简单，因此光谱干扰小

简要叙述原子荧光光谱分析法原理及方法的主要特点

4，荧光分析法的特点

荧光分析是一种先进的分析方法，它比电子探针法、质谱法、光谱法、极谱法等都应用的较广泛和普及，这同荧光分析具有很多优点分不开的。荧光分析所用的设备较简单，如目测荧光仪和荧光光度计构造非常简单完全可以自己制造。比起质谱仪、极谱仪和电子探针仪来它在造价上要便宜很多倍，而且荧光分析的最大特点是：分析灵敏度高、选择性强和使用简便。同时具备这三大特点的仪器并不多 。 在紫外线照射下能直接发射荧光的化学元素并不很多，所以对一些元素进行荧光分析时大部分采用间接测定法，这就是用有机试剂与被测定的元素组成络合物。这些络合物在紫外线照射下能发射出不同波长的荧光素，然后由荧光强度测定出该元素的含量。由于有机荧光试剂的品种繁多，用荧光分析可测定的元素有六十多种 。例如对铅的荧光分析：铅离子Pb与Cl离子组成铅氯络合物，该络合物在短波紫外光270毫微米激发下，它会发射出蓝色荧光，荧光峰值波长在480毫微米，根据荧光强度在标准工作曲线上测定出Pb的含量。该法能测定0.1~0.6微克铅/毫升。

5，为什么荧光分析法的灵敏度比紫外可见分光光度法高

因为荧光分析法属于发光分析 只有待测物分子可以发出指定波长的荧光 紫外-可见分光光度法是吸光光度法 除待测物之外 其它物质也可能对入射光产生吸收 和波长没有关系我刚读研 做的就是荧光分析
因为荧光或磷光分析法是在入射光的直角方向测定荧光强度,即在黑背景下进行检测,因此可以通过入射光强度i或者增大荧光或者磷光信号的放大倍数来提高灵敏度,而紫外-可见法中测定的参数是吸光度,该值与入射光强度和透射光强度的比值相关,入射强度增大,透射光强度也随之增大,增大检测器的放大倍数也同时影响入射光和透射光的检测,因而限制了灵敏度的提高望采纳
这是由于荧光分析法是在入射光直角方向测定荧光强度，即在黑背景下检测，因此可以通过增加入射光强度来提高灵敏度，而紫外可见测定参数是A，该值与入射光强度和透射光比值有关，入射光增大，透射光也增大，增大检测器的放大倍数，也影响入射光和透射光的检测，因此限制了灵敏度
因为·入射光强的原因 在紫外-可见分光光度法中入射光强 吸收光强就增加 而荧光分析法中入射光强增加 不会影响吸收光强 所以A增加 灵敏度提高 第二是仪器结构不同紫外-可见分光光度法中是平行的 而荧光分析法是垂直的
据说是，紫外是由于电子从基态跃迁到激发态，是从稳态到不稳态，所以比较困难，灵敏度低；而荧光则是由激发态返回基态，从不稳态到稳态，大势所趋呀，所以容易测，即灵敏度高。按理说同一物质其紫外吸收波长和荧光发射波长应该是一致的，如果仪器好的话。 又，在另一本书上说，与紫外比，荧光是从与入射光垂直方向检测，即在黑背景下检测荧光的发射，所以一般荧光分析的灵敏度比紫外高2~4个数量级。

6，荧光分析法是以什么定律为基础的

答：荧光分光光度计是以朗伯比尔定律为基础进行定性定量分析的仪器.使用荧光分光光度计,主要用于荧光定量分析法,定量的基础依据是朗伯比尔定律.
时间分辨荧光分析法（time resolved fluoroisnmunoassay,trfia）是近十年发展起来的一测微量分析方法，是目前最灵敏的微量分析技术,其灵敏度高达10-19，较放射免疫分析（ria）高出3个数量级。 　　时间分辨荧光分析法（trfia）实际上是在荧光分析（fia）的基础上发展起来的，它是一种特殊的荧光分析。荧光分析的利用了荧光的波长与其激发波长的巨大差异克服了普通紫外－可见分光分析法中杂色光的影响，同时，荧光分析与普通分光不同，光电接受器与激发光不在同一直线上，激发光不能直接到达光电接受器，从而大幅度的提高了光学分析的灵敏度。但是，当进行超微量分析的时候，激发光的杂散光的影响就显得严重了。因此，解决激发光的杂散光的影响成了提高灵敏度的瓶颈。 　　解决杂散光影响的最好方法当然是测量时没有激发光的存在。但普通的荧光标志物荧光寿命非常短，激发光消失，荧光也消失。不过有非常少的稀土金属（eu、tb、sm、dy)的荧光寿命较长，可达1－2ms，能够满足测量要求，因此而产生了时间分辨荧光分析法，即使用长效荧光标记物，在关闭激发光后再测定荧光强度的分析方法。 　　平时常用的稀土金属主要是eu(铕）和tb(铽），eu荧光寿命1ms,在水中不稳定，但加入增强剂后可以克服；tb荧光寿命1.6ms，水中稳定，但其荧光波长短、散射严重、能量大易使组分分解，因此从测量方法学上看tb很好，但不适合用于生物分析，故eu最为常用。 　　由于常用eu作为荧光标记，因此增强剂就成了试剂中的重要组成。增强剂原理：利用含络合剂、表面活性剂的溶液的亲水和亲脂性同时存在，使eu在水中处于稳定状态。现在有些试剂，在络合eu在抗体上时已考虑了增强问题，而使用了具有增强作用的新络合剂，因而有的试剂没有单独的增强剂。 　　随着检验医学的发展，对微量、超微量的测定会越来越多，同时ria的污染问题会越来越被重视，因此，时间分辨荧光分析法（trfia）具有越来越大的应用空间。

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