激光共聚焦显微镜，激光共聚焦显微镜的成像原理是怎样的

本文目录一览

1，激光共聚焦显微镜的成像原理是怎样的
2，激光共聚焦显微镜品牌有什么值得选择
3，倒置荧光显微镜与激光共聚焦显微镜有什么区别
4，激光共聚焦显微镜用途
5，激光扫描共焦显微镜定义
6，材料型激光共聚焦显微镜为什么用405激光
7，激光扫描共聚焦显微镜的激光共聚焦显微镜原理
8，激光共聚焦显微镜的分辨率
9，激光共聚焦显微镜能解决什么问题
10，激光扫描共聚焦显微镜技术的主要应用范围

1，激光共聚焦显微镜的成像原理是怎样的

显微镜分为主要由目镜和物镜来进行成像，它们都是凸透镜。

激光共聚焦显微镜的成像原理是怎样的

2，激光共聚焦显微镜品牌有什么值得选择

激光共聚焦显微镜品牌，肯定就是奥林巴斯啊！奥林巴斯国际老品牌了，掌握了很多先进的显微镜技术，所以这个牌子的激光共聚焦显微镜非常实用，且性能很高。奥林巴斯激光共聚焦显微镜OLS5100可以说是适用于所有材料分析的检测需求，拥有智能的工作流程和快速的实验设计、卓越的测量精度，可以精确测量各种亚微米级形状和表面粗糙度，实用度非常高。奥林巴斯激光共聚焦显微镜为各行业带来性能优秀的检测工具，非常值得选择。

激光共聚焦显微镜品牌有什么值得选择

3，倒置荧光显微镜与激光共聚焦显微镜有什么区别

荧光显微镜和激光共聚焦显微镜的区别激光共聚焦显微镜是采用激光作为光源，在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置，并利用计算机对所观察的对象进行数字图象处理的一套观察、分析和输出系统。主要系统包括激光光源、自动显微镜、扫描模块（包括共聚焦光路通道和针孔、扫描镜、检测器）、数字信号处理器、计算机以及图象输出设备（显示器、彩色打印机）等。通过激光扫描共聚焦显微镜，可以对观察样品进行断层扫描和成像。因此，可以无损伤的观察和分析细胞的三维空间结构。同时，通过激光扫描共聚焦显微镜也是活细胞的动态观察、多重免疫荧光标记和离子荧光标记观察的有力工具.精确地对光谱的本质进行分析，区分发射光谱高度重叠的不同标记的信号。最重要的是，对于多色的荧光染色，它能彻底消除了荧光串色的影响，同时最大限度的减少了样品荧光信号的损失。这些都是一般光镜所不能达到的。

倒置荧光显微镜与激光共聚焦显微镜有什么区别

4，激光共聚焦显微镜用途

一种是荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置，在生物及医学研究中应用的激光共聚焦显微镜，能得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像，在亚细胞水平上观察诸如Ca2+ 、PH值，膜电位等生理信号及细胞形态的变化，是形态学，分子生物学，神经科学，药理学，遗传学等领域中新一代强有力的研究工具。另一种激光共聚焦显微镜是以共聚焦显微测量技术为原理、结合精密Z向扫描模块、3D 建模算法等对器件表面进行非接触式扫描并建立表面3D图像，用于对各种精密器件及材料表面进行微纳米级测量的检测仪器。它主要实现器件表面形貌3D测量，在材料生产检测领域中能对各种产品、部件和材料表面的面形轮廓、表面缺陷、磨损情况、腐蚀情况、平面度、粗糙度、波纹度、孔隙间隙、台阶高度、弯曲变形情况、加工情况等表面形貌特征进行测量和分析。激光共聚焦扫描显微镜

5，激光扫描共焦显微镜定义

工作原理激光扫描显微镜是建立在光学显微镜及各种扫描显微镜基础上的一种新型的扫描成象系统。利用聚焦的激光束在样品表面扫描，同时利用光电检测器件接收样品反射光（或透射光），样品结构的变化使反射光（或透射光）强度改变，因而使光电检测器的输出电流改变，经信号处理，同步显示在计算机屏幕上。由于照射在样品的是聚焦的激光束，具有很小的直径，因此没有来自邻近区域的散射光的影响，从而可以提高信噪比，即增强了对比度。同时由于激光扫描显微镜是直接接收反射光（或透射光），因此检测灵敏度高，且检测系统比较简单。本仪器采用共焦方法，还可以在光束能透入的范围内实现深度剖面的分层成象，因此成为研究薄膜材料、集成电路及生物组织乃至细胞等的微细结构及其深度剖面的非常有效的工具。对半导体器件，由于光电效应，可通过适当负载直接接收光电流，将光电信号通过成象处理，即可得到光电成象。

6，材料型激光共聚焦显微镜为什么用405激光

材料型激光共聚焦显微镜用405激光可满足大部分荧光样品的测试要求。激光扫描共聚焦显微技术（LaserScanningConfocalMicroscopy）是上世纪80年代中期发展起来的一种光学成像技术，可以在不损伤样品的条件下对样品进行深层形态结构分析，具有成像速度快、分辨率高（与普通光学显微镜相比）、制样要求低、可对样品进行三维重建、与样品不直接接触，可实时反映样品表面或内部真实情况等特点，广泛应用于材料学、生物学、医学和地质学等研究领域。LeicaTCSSP5型激光共聚焦显微镜为倒置显微镜，适用于生物样品的观察。其拥有四个激光器，可发射405nm、458nm、476nm、488nm、514nm、543nm和633nm激光，可满足大部分荧光样品的测试要求，除了可对样品进行三维重构外，其拥有的多种扫描模式还可以提供荧光波长探测、时间序列扫描、荧光漂白恢复、荧光共振能量转移等测试服务。

7，激光扫描共聚焦显微镜的激光共聚焦显微镜原理

在普通宽视野光学显微镜中，整个标本全部都被水银弧光灯或氙灯的光线照明，图像可以用肉眼直接观察。同时，来自焦点以外的其他区域的荧光对结构的干扰较大，尤其是标本的厚度在 2um 以上时，其影响更为明显。激光共聚焦显微镜脱离了传统光学显微镜的场光源和局部平面成像模式，采用激光束作光源，激光束经照明针孔，经由分光镜反射至物镜，并聚焦于样品上，对标本焦平面上每一点进行扫描。组织样品中如果有可被激发的荧光物质，受到激发后发出的荧光经原来入射光路直接反向回到分光镜，通过探测针孔时先聚焦，聚焦后的光被光电倍增管（PMT）探测收集，并将信号输送到计算机，处理后在计算机显示器上显示图像。在这个光路中，只有在焦平面的光才能穿过探测针孔，焦平面以外区域射来的光线在探测小孔平面是离焦的，不能通过小孔。因此，非观察点的背景呈黑色，反差增加，成像清晰。由于照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的，焦平面上的点同时聚焦于照明针孔与探测针孔，焦平面以外的点不会在探测针孔处成像，即共聚焦[7]。以激光作光源并对样品进行扫描，在此过程中两次聚焦，故称为激光扫描共聚焦显微镜。

8，激光共聚焦显微镜的分辨率

激光扫描共聚焦显微镜采用聚焦后的激光光斑作为照明光源，同时在探测器前引入针孔将聚焦光斑外的干扰信号进行过滤，因此提高了图像信噪比，横向分辨率可达200nm左右。激光共聚焦显微镜（LSC）是一种高分辨率非常普遍的显微技术。它采用激光束共聚于投影像中，从而达到快速和自动聚焦的目的，可以用于显微成像和定量分析。激光共聚焦显微镜可以更快地实现观察不可见的微小物体，其分辨率可以达到单位处纳米尺度，可以将微小物体变成清晰可见的超微结构。比如以分子尺度看细胞内分子机制，在癌症研究中可以用它准确定位细胞内的蛋白质，也可以全面的研究微生物的内部生物学结构，从而更好的了解微生物之间的关系。LSC的分辨率取决于其投影物镜的质量。一般情况下，当投影物镜的折射率和空气之间的折光率差距越小，实现的分辨率就越高。当它们的差距小于10时，可以达到1nm的分辨率，甚至可以突破它，达到极高的分辨率。采用激光共聚焦显微镜的成像分辨率，得到的图像清晰度比传统的远小技术更高。因此，激光共聚焦显微镜是显微学的一项重要技术，它的分辨率对提高显微成像的清晰度起着重要作用。

9，激光共聚焦显微镜能解决什么问题

首先你应该明白激光共聚焦显微镜的优点：分辨率高，扫描速度快，有更强大的图像处理功能。陕西午禾科技代理的日本Lasertec共聚焦显微镜，http://www.wuhe.com.cn/products_list.html，最左边上面两个产品就基本上能够说明共聚焦显微镜的优势和用途了。另外，百度百科里也说明了一些在生物领域的应用。http://baike.baidu.com/link?url=JVP3Wv6-sW03JVbG0muE1-L8iMf4si0XQgKxhQ_eT-eL4gI8OCjJs2OgzvjVeN6hn_m2r8VkNV5jUWApad1bCK

10，激光扫描共聚焦显微镜技术的主要应用范围

激光扫描共聚焦显微镜（Confocal laser scanning microscope，CLSM)是近代最先进的细胞生物医学分析仪器之一。目前，激光扫描共聚焦显微技术已用于细胞形态定位、立体结构重组、动态变化过程等研究，并提供定量荧光测定、定量图像分析等实用研究手段，结合其他相关生物技术，在形态学、生理学、免疫学、遗传学等分子细胞生物学领域得到广泛应用。1. 组织和细胞中的定量荧光测定　　激光扫描共聚焦显微镜可以从固定和荧光染色的标本以单波长、双波长或多波长模式，对单标记或多标记的细胞及组织标本的共聚焦荧光进行数据采集和定量分析,同时还可以利用沿纵轴上移动标本进行多个光学切片的叠加，形成组织或细胞中荧光标记结构的总体图像,以显示荧光在形态结构上的精确定位。常用于原位分子杂交、肿瘤细胞凋亡观察、单个活细胞水平的 DNA 损伤及修复等定量分析。2. 细胞间通讯的研究　　动物和植物细胞中缝隙连接介导的胞间通信在细胞增殖和分化中起着重要作用。激光扫描共聚焦显微镜可通过观察细胞缝隙连接分子的转移来测量传递细胞调控信息的一些离子、小分子物质。该技术可以用于研究胚胎发生、生殖发育、神经生物学、肿瘤发生等过程中缝隙连接通讯的基本机制和作用，也可用于鉴别对缝隙连接作用有潜在毒性的化学物质。3. 细胞物理化学测定　　激光扫描共聚焦显微镜可对细胞形状、周长、面积、平均荧光强度及细胞内颗粒数等参数进行自动测定。能对细胞的溶酶体、线粒体、内质网、细胞骨架、结构性蛋白质、DNA、RNA、酶和受体分子等细胞内特异结构的含量、组分及分布进行定量、定性、定时及定位测定。4. 细胞内钙离子和 pH 值动态分析　　激光扫描共聚焦显微镜技术是测量若干种离子浓度并显示其分布的有效工具，对焦点信息的有效辨别使在亚细胞水平显示离子分布成为可能。利用荧光探针，激光扫描共聚焦显微镜可以测量单个细胞内 pH 和多种离子(Ca2+、K+、Na+、Mg2+)在活细胞内的浓度及变化。一般来说，电生理记录装置加摄像技术检测细胞内离子量变化的速度相对较快,但其图像本身的价值较低,而激光扫描共聚焦显微镜可以提供更好的亚细胞结构中钙离子浓度动态变化的图像,这对于研究钙等离子细胞内动力学有意义。4. 三维图像的重建　　传统的显微镜只能形成二维图像，激光扫描共聚焦显微镜通过对同一样品不同层面的实时扫描成像，进行图像叠加可构成样品的三维结构图像。它的优点是可以对样品的立体结构分析，能十分灵活、直观地进行形态学观察,并揭示亚细胞结构的空间关系。5. 荧光漂白恢复技术　　该方法的原理是一个细胞内的荧光分子被激光漂白或淬灭，失去发光能力，而邻近未被漂白细胞中的荧光分子可通过缝隙连接扩散到已被漂白的细胞中，荧光可逐渐恢复。可通过观察已发生荧光漂白细胞其荧光恢复过程的变化量来分析细胞内蛋白质运输、受体在细胞膜上的流动和大分子组装等细胞生物学过程。6. 长时程观察细胞迁移和生长　　活细胞观察通常需要一定的加热装置及灌注室，以保持培养液的适宜温度及 CO2 浓度的恒定。目前的激光扫描共聚焦显微镜，其光子产生效率已大大改善，与更亮的物镜和更小光毒性的染料结合后可以减小每次扫描时激光束对细胞的损伤,用于数小时的长时程定时扫描,记录细胞迁移和生长等细胞生物学现象。7. 在细胞及分子生物学基础研究中的应用　　激光扫描共聚焦显微镜应用照明针与检测孔共轭成像，有效抑制了焦外模糊成像并可对标本各层分别成像，对活细胞行无损伤的“光学切片”这种功能也被形象的称为“显微 CT”。CLSM 还可以对贴壁的单个细胞或细胞群的胞内、胞外荧光作定位、定性、定量及实时分析，并对胞内成分如线粒体、内质网、高尔基体、DNA、RNA、Ca2+、Mg2+、Na+ 等的分布、含量等进行测定及动态观察，使细胞结构和功能方面的研究达到分子水平。8. 在肿瘤和抗癌药物筛选研究中的应用　　普通显微镜及电子显微镜，仅能对肿瘤相关抗原进行定性分析，而 CLSM 则可对单标记或者多标记细胞、组织标本及活细胞进行重复性极佳的荧光定量分析，从而对肿瘤细胞的抗原表达、细胞结构特征，抗肿瘤药物的作用及机制等方面定量化。9. 在血液病学和医学免疫学研究中的应用　　激光扫描共聚焦显微镜观察免疫细胞和系统，如树突状细胞、单核-吞噬细胞系统、自然杀伤细胞、淋巴细胞时，在准确细胞定位的同时有效鉴定免疫细胞的性质。10. 在大脑和神经科学中的应用　　激光扫描共聚焦显微镜分层扫描发现神经轴突的内部结构连续性好。用激光扫描共聚焦显微镜能观察到脑干组织中神经轴突的正常走向，可排除在荧光显微镜下由此造成的一些病理假象。并且激光扫描共聚焦显微镜能观察神经轴突的三维结构，因此应用 CLSM 有可能观察到普通光镜下未能发现的神经组织的细微病变。11. 在眼科研究中的应用　　利用激光扫描共聚焦显微镜可以观察晶状体，角膜、视网膜、虹膜和睫状体的结构和病理变化。12. 在骨科研究领域中的应用　　激光扫描共聚焦显微镜在骨科研究领域的应用现状表明，CLSM在观测骨细胞形态学研究、骨细胞特异性蛋白（骨钙素）以及骨细胞之间的相互作用具有显著的优势。

三者都是点源逐点扫描成像，通过控制扫描驱动范围，调节放大倍数，主要区别1、极限分辨率不同, 缘于放大信号源的差异激光共聚焦：极限分辨率 150nm. 扫描电镜：20nm~0.8nm. 原子力显微镜：极限分辨率0.1nm2、扫描驱动方式不同激光共聚焦：激光转镜控制激光扫描范围和扫描速度。扫描电镜：电磁线圈控制电子束扫描范围和扫描速度，原子力显微镜：压电位移传感器驱动样品台x,y 方向扫描，3、立体成像的差别激光共聚焦：通过纳米精度步进电机驱动样品在z轴方向逐层成像，软件将设定的各层图像合成清晰立体图像。扫描电镜：单帧图像具有很大景深，但属于二维图像，通过立体对技术可实现三维成像。原子力显微镜：成像的本质就是测量表面每个像素点的高低，描绘出立体形貌。4、工作环境差别激光共聚焦和原子力显微镜可以在大气环境中进行测试样品一般扫描电镜必须在高真空环境下进行测试样品5、应用范围差别激光共聚焦：几倍 ~ 几千倍，样品制备简单扫描电镜：几倍~几十万倍，样品制备稍微复杂一些，但总体也很简单。原子力显微镜：几万倍~几千万倍，要求样品非常平坦，样品制备很难。6、价格

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